2020-09-29 09:54:56admin 3945

陽(yáng)離子交換柱層析原理是利用樹(shù)脂的電荷基團(tuán)與水中的離子發(fā)生反應(yīng)，從而分離水中的混合物這就是層析。

什么是離子交換柱層析

離子交換柱層析使用離子交換樹(shù)脂（一種具有離子交換特性的物質(zhì)）作為固定相，用于與流動(dòng)相中的特定離子進(jìn)行可逆交換，從而分離混合物的層析方法

例如，陽(yáng)離子交換樹(shù)脂對(duì)離子的結(jié)合力按以下順序。 Li +蛋白質(zhì)和其他生物聚合物通常是兩性的，它們與陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的結(jié)合主要與它們的性質(zhì)和pH有關(guān)。以用陽(yáng)離子交換樹(shù)脂分離蛋白質(zhì)為例，在某些pH條件下，等電點(diǎn)pI pH的蛋白質(zhì)帶正電，并且可以與陽(yáng)離子交換樹(shù)脂結(jié)合。通常pI越高，蛋白質(zhì)與離子交換樹(shù)脂的結(jié)合越強(qiáng)。

陽(yáng)離子交換柱層析原理

層析法的最基本特征是它具有固定相和流動(dòng)相。當(dāng)由于混合物成分的物理和化學(xué)性質(zhì)（吸附，溶解度，分子形狀和大小，分子等）使兩相相互移動(dòng)時(shí)，由于電荷和親和力等的不同，使兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配而得到分離。

離子交換柱層析是基于各種離子或離子化合物的分離和純化，以及離子交換樹(shù)脂的結(jié)合強(qiáng)度。離子交換柱層析的固定相是一種離子交換樹(shù)脂，由一種不溶于水的惰性聚合物基質(zhì)形成，該基質(zhì)通過(guò)特定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)連接至特定的電荷基團(tuán)。離子交換樹(shù)脂可分為三部分：聚合物基質(zhì)，電荷基團(tuán)和抗衡離子。

電荷基團(tuán)與聚合物共鍵形成離子可交換的電荷基團(tuán)?？购怆x子是與帶電基團(tuán)結(jié)合的抗衡離子，可與溶液中的其他離子基團(tuán)發(fā)生可逆交換反應(yīng)。抗衡離子帶正電的離子交換樹(shù)脂可以交換成帶正電的離子基團(tuán)，稱(chēng)為陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。帶負(fù)電荷離子交換樹(shù)脂的抗衡離子交換帶負(fù)電荷的離子基團(tuán)，被稱(chēng)為陰離子交換樹(shù)脂。

陽(yáng)離子交換柱的使用方法

1.交換

將測(cè)試溶液添加到交換柱中，并使用活塞控制交換的特定流速。片刻之后上層樹(shù)脂全部被交換、下層未被交換，中間則部分被交換，這一段稱(chēng)為“交界層”。

2.裝柱

離子交換通常在離子交換柱中進(jìn)行。離子交換柱通常由玻璃制成，并且在安裝交換柱時(shí)，將一層玻璃絲鋪設(shè)在交換柱的下端，倒入少量水，并倒入含有水的樹(shù)脂。樹(shù)脂下沉以形成交換層。安裝離子交換柱時(shí)，請(qǐng)確保在樹(shù)脂層中沒(méi)有氣泡殘留，以便在更換過(guò)程中測(cè)試溶液不與樹(shù)脂接觸。樹(shù)脂的高度通常為柱高度的約90％。還應(yīng)在離子交換柱的頂部放置一層玻璃纖維，以防止添加測(cè)試溶液時(shí)樹(shù)脂被洗掉。安裝更換離子交換柱后，請(qǐng)用蒸餾水清洗并關(guān)閉活塞以供使用。由于不能讓樹(shù)脂暴露于空氣中，溶液的添加會(huì)在樹(shù)脂間隙中形成氣穴，導(dǎo)致交換不徹底。

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